バイオセンサ関連製品の製造販売、受託研究開発の株式会社バイオデバイステクノロジー│石川県能美市

DEP-­Chip測定例ではDEP-­Chipを使った、電気化学的DNA検出法（凝集法）と、それによるDNA濃度測定・DNA検出の他、グルコース濃度測定をご紹介しています。

1.電気化学的DNA検出法（凝集法）の原理と特長
2.電気化学的DNA検出法（凝集法）による濃度測定
 ・DNA濃度測定1
 ・DNA濃度測定2（PCR増幅産物濃度測定値の比較）
3.電気化学的DNA検出法（凝集法）によるDNA遺伝子検出
 ・サルモネラ菌遺伝子検出
 ・腸管出血性大腸菌遺伝子検出
 ・GMトウモロコシ遺伝子検出
 ・血液からのHBV遺伝子検出
4.DEP-­Chipを用いたグルコース濃度の測定

1.電気化学的DNA検出法（凝集法）の原理と特長

電気化学的DNA検出法（凝集法）は特許です。（特許登録3511596）

2.電気化学的DNA検出法（凝集法）によるDNA濃度測定

測定条件
LSV：掃引速度　100mV/sec、掃引範囲　0.­1V
DNA：サケ精子由来

初期コピー数、PCRのサイクル数の条件を変えてPCRを行い、得られたPCR産物の濃度を2種類の方法（吸光度法、電気化学的法）で測定し比較。

3.電気化学的DNA検出法（凝集法）によるDNA遺伝子検出

Total 50μLのPCR反応後、
2μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladder

Total 25μLのLAMP反応後、
1μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladder

Total 25μLのLAMP反応後、
1μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladde

LAMP Condition
65℃,60min.

Template
a:Positive Control DNA
b:Negative Control
c:陽性検体1（大腸菌O157ゲノム102copy）
d:陽性検体2（大腸菌O157ゲノム103copy）
e:陰性検体2（大腸菌O18ゲノム102copy）

Total 25μLのLAMP反応後、
1μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladder

LAMP Condition
65℃,60min.

Template
a:陽性コントロールプラスミド
b:トウモロコシゲノム　（遺伝子組み換え体ではない）
c:Ｄ.W.

Total 50μLのPCR反応後、
2μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladder

Template
a:HBV患者血液1（HBV­DNA(+)）
b:HBV患者血液2（HBV­DNA(++)）
c:健常者血液　 （HBV­DNA(­)

Total 25μLのLAMP反応後、
1μLの反応液を解析。
M:50­2000 bp Ladder

Template
a:HBV患者血液1（HBV­DNA(+)）
b:HBV患者血液2（HBV­DNA(++)）
c:健常者血液　 （HBV­DNA(­)）

4.DEP-­Chipを用いたグルコース濃度の測定

グルコースオキシターゼを使用し、クロノアンペロメトリーで測定した。

グルコースオキシターゼを電極表面上にドライアップにより固定化し、クロノアンペロメトリーで測定した。 非固定の場合と比較して、電流値が高く、測定レンジが広い。

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